此前(4月19日),国务院医药管理局、医院管理局印发《关于进一步做好疫情期间新型冠状病毒检测工作的通知》,要求各三级综合医院建立符合生物安全2级的临床检测工作。及以上标准。具有独立开展新冠病毒检测能力的实验室。此次,卫健委提出检测机构覆盖二级以上综合医院,意味着核酸检测机构将扩大到县、市、区。
PCR实验室应用:
1、可大大增加DNA的微量。PCR是分子生物学研究和实验的常规方法,广泛应用于生物学的各个领域。
2、临床检测:艾滋病、乙肝、禽类疾病检测、癌基因检测诊断、DNA指纹图谱、个体鉴定、亲子鉴定。
3、第三方检测:法医证据、动植物检疫、动物及其衍生产品检测、动物饲料、化妆品、食品卫生检测、转基因作物和转基因微生物等。
临床 PCR 实验室工作流程:
试剂储存制备→标本制备→DNA扩增→产物分析。
1、试剂制备区:
该区域的功能是储存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合物的制备。
平衡 | MF1035C | 配制试剂和称量物料时使用 |
PH计 | OLABO-P10 | 在制备试剂时测量 pH 值时使用 |
电磁搅拌机 | SH-4A | 制备试剂时搅拌(运行缓冲液、染色剂、凝胶) |
-25°C 冰箱 | BDF-25V350 | 试剂需要储存在-20°C(必需) |
冰箱 | BXC-250 | 放置试剂(必填) |
混合器 | 涡流-1 | 在添加或制备试剂之前预先混合液体(必需) |
纯水机 | OSJ-MT-10L | 用于制备纯水、制备试剂和PCR系统 |
吸管 | 用于移液(必需) |
2. 标本制备区:
该区域的功能是临床标本的保存、核酸(RNA和DNA)的提取和储存,以及向扩增反应管中添加核酸。为了防止相邻区域的空气进入该区域,应将压力梯度设置为与相邻区域相比的正压。
安全柜 | BSC-4FA2 | 向试剂板添加生物活性样品(如血清、全血等)的操作需要在生物安全柜中进行。 |
水浴 | 如果在低温下储存,一些提取试剂可能会结晶。使用前,用水浴使液体澄清。一些用于手动核酸提取的试剂盒将具有水浴孵育步骤。 | |
PCR柜 | PCR-800 | PCR系统的制备需要在PCR柜内完成,防止气溶胶污染。 |
微量离心机 | 迷你 5 | 添加前混合并离心样品。 |
干式恒温器 | BJPX-DB2 | 与水浴功能相同,可相互更换。 |
混合器 | 涡流-1 |
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核酸提取器 | BNP32 | 提取和纯化核酸。 |
3.产品放大区域
该区域的作用是DNA扩增。实验放大的污染指数较高,与邻近区域相比,压力梯度应设置为负压。这样做的好处是可以有效防止气溶胶从该区域泄漏。
PCR仪 | PCR仪完成后需要进行琼脂糖凝胶电泳,电泳后使用凝胶成像系统进行观察。 |
荧光定量PCR | 通过不同浓度标准品制作的标准曲线,机器可直接给出样品的原始拷贝数,可绝对定量。这是实验的结束。 |
4.放大产品分析领域:
该区域的作用是检测相关的扩增片段。
电泳设备 | PCR机完成后,后续电泳. |
凝胶成像系统 | 琼脂糖凝胶电泳后,用凝胶成像系统观察胶片,确定目标条带是否被放大. |
上面列出的是建立 PCR 实验室的完整清单。
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发布时间:2022-03-08